Xərçənglə mübarizədə inqilab edəcəyi gözlənilən molekulyar diaqnostika texnologiyaları bu gün çox sürətlə inkişaf edir. Getdikcə daha tez-tez eşidirik ki, xərçəngin erkən mərhələlərində diaqnoz qoymağa və effektiv fərdi müalicə təyin etməyə imkan verən yeni genetik testlər yaranır. Rospotrebnadzorun Mərkəzi Elmi-Tədqiqat Epidemiologiya İnstitutunda yüksək məhsuldar sekvensiya texnologiyaları əsasında yeni diaqnostika üsullarının hazırlanması üzrə elmi qrupun rəhbəri, biologiya üzrə fəlsəfə doktoru Mednovosti-yə onkologiyada genetik diaqnostikanın bu günü və gələcəyi haqqında danışıb. Kamil Xafizov.
Kamil Fəridoviç, molekulyar analiz texnologiyaları onkoloji diaqnostikada nələri təmin edir?
— Burada bir neçə əsas tədqiqat istiqamətini müəyyən etmək olar. Onlardan biri xərçəngin müxtəlif növlərinə irsi meylinin müəyyən edilməsidir ki, bu da xərçəngin inkişaf ehtimalını artıran “sınıq” genlərin daşıyıcılarını müəyyən etməyə imkan verir.
Onkologiyanın digər vacib sahəsi “məqsədli” terapiyanın seçilməsidir – artıq diaqnoz qoyulmuş və ən təsirli müalicə təyin edilməli olan xəstələrin diaqnostikası. Bu araşdırma müəyyən dərmanların təsirli olub-olmayacağı sualına cavab verən genetik markerlərə əsaslanır. Bu testlərin təkcə tibbi deyil, həm də iqtisadi əhəmiyyəti var. Bəzi hallarda, hər kəs üçün göstərilməyən çox bahalı terapiyaya kor-koranə pul xərcləməkdənsə, əvvəlcə 10-20 min rubla başa gələn diaqnostikadan keçmək daha müdrikdir. Məsələn, ötən il Rusiya bazarına BRCA1 və yumurtalıq xərçəngində 2 gendə müəyyən mutasiyaların olması ilə təsirli olan olaparib dərmanı çıxarılıb. Dərman bahalıdır, təxminən yarım milyon rubla başa gəlir, buna görə də təsirli olub-olmadığını müəyyən etmək üçün əvvəlcə mutasiyalar üçün analiz aparmaq məsləhətdir.
Nəhayət, lazımi tədbirlərin vaxtında görülməsinə və xəstələrin sağalma şansını kəskin şəkildə artırmağa imkan verən erkən mərhələlərdə xərçəngin diaqnostikasının minimal invaziv üsullarının inkişafına böyük maraq var. Bir yanaşma, qanda sərbəst dövran edən DNT-dən istifadə edərək xərçəngə diaqnoz qoymaqdır. Bədəndə şiş yarandıqda, erkən mərhələdə heç bir şəkildə özünü göstərməyə bilər, insan özünü yaxşı hiss edir, özünü sağlam hesab edir və onkoloqa müraciət etməyi planlaşdırmır. Lakin şiş hüceyrələri (hər hansı digər hüceyrələr kimi) vaxtaşırı öldüyündən, şişin yaranmasına səbəb olan mutasiyaları olan kiçik DNT fraqmentlərini qana buraxırlar. Qan plazmasında dolaşan sağlam DNT fonunda belə molekulların sayı çox azdır, ona görə də onların standart üsullarla aşkarlanması çətin və hətta qeyri-mümkündür. Bununla belə, bu cür molekulları “tutmağa” və xəstənin bədənində inkişaf etməyə başlayan onkoloji xəstəlik haqqında nəticə çıxarmağa imkan verən yanaşmalar artıq ortaya çıxdı.
Bu necə mümkün oldu?
— Bütün bu analizlər fərdi genləri və hətta bütün genomları oxumağa imkan verən yüksək məhsuldarlıqlı sekvensiya texnologiyalarının və ya NGS ardıcıllığının (İngiliscə Next Generation Sequencing-dən) yaranması ilə sıx bağlıdır. Cəmi on il əvvəl təxminən bir milyon dollara başa gəlirdisə, bu gün minə yaxındır. Və hansı mutasiyaların spesifik irsi xəstəliklərə səbəb olduğunu bilsək, o zaman müəyyən markerləri müəyyən etməklə onlara diaqnoz qoymaq olar. Beləliklə, yüksək məhsuldarlıq ardıcıllığı apararkən, on və hətta yüz minlərlə nukleotid olan bütün geni oxuya bilərik. Halbuki, birinci nəsil sekvensiya texnologiyalarından istifadə edərək, ya “zərərli” mutasiyaların yarana biləcəyi xüsusi “nöqtələrə” və ya genomun çox kiçik fraqmentlərinə baxırlar. Bütün bunlar çoxlu sayda irsi xəstəliklərə diaqnoz qoymağa imkan verdi, onların əksəriyyəti təbiətdə genetikdir.
Bunlar hansı testlərdir? Onlar necə həyata keçirilir?
— Ən sadə halda, molekulyar biologiya metodlarından istifadə etməklə, müəyyən mutasiyaları tapmaq şansı olan yerdə genomun konkret fraqmenti “zənginləşdirilir”. Sonra, DNT nümunəsi ilə bir sıra manipulyasiyalardan sonra ardıcıllığın özü baş verir, yəni DNT fraqmentlərinin nukleotid ardıcıllığının xüsusi cihazlarda – sekvenserlərdə oxunması. Daha sonra ixtisaslaşdırılmış bioinformatika analizindən istifadə edərək tədqiq olunan genlərdə arzu olunan mutasiyaların olub-olmaması haqqında hesabat yaradılır.
Laboratoriya sekvensatoru ilə işləyir. Gorich/Shutterstock.
Başqa bir misal olaraq institutumuzda mövcud olan Qiagen-dən Genereader sequencer üzərində aparılan testi göstərə bilərəm. Test xərçəngin beş növündə – ağciyər xərçəngi, prostat xərçəngi, döş xərçəngi, melanoma və mədə xərçəngində baş verən spesifik mutasiyaların aşkar edilməsinə yönəlib. Bu məqsədlə, sadalanan xərçəng növlərində mutasiyaların baş verdiyi bir neçə genin “paneli” hazırlanmışdır. Test tərtibatçıları hazırda dünyada mövcud olan, eləcə də yaxın illərdə bazara çıxa biləcək bütün dərmanların geniş siyahısını götürüblər. Daha sonra onlar müxtəlif verilənlər bazaları və elmi məqalələr üzərində geniş axtarış apardılar və bu məlumat əsasında dərmanları xüsusi genetik markerlərlə əlaqələndirdilər. Testin nəticəsi, aşkar edilmiş mutasiyaların siyahısına əlavə olaraq, bu xüsusi xəstəyə kömək edə biləcək dərmanların siyahısını ehtiva edən bir hesabatdır.
Analiz üçün venadan qan alınırmı?
– Sınaqdan asılıdır. İrsi meyli müəyyən etmək üçün – bəli, çox vaxt qan olur, lakin bukkal epiteli də uyğundur, bunun üçün yanağı pambıq çubuqla sürtmək kifayətdir. Nuklein turşularını təcrid etmək üçün laboratoriya dəstləri adətən xüsusi toxuma növləri ilə işləmək üçün nəzərdə tutulsa da, bizə lazım olan tək şey hər hüceyrədə olan genomik DNT-dir. Məqsədli terapiya seçmək üçün fərqli bir yanaşma istifadə olunur. Bu halda, adətən əməliyyat zamanı götürülən şiş nümunələrindən əldə edilən DNT molekulları ardıcıllaşdırılır, çünki müalicə zamanı genetik “pozulmaları” olan şiş hüceyrələrini xüsusi olaraq hədəf almaq vacibdir.
Bu gün ən çox tanınan mutasiyalar BRCA genləridir.
— Həqiqətən də, bu gün dünyada bir sıra onkoloji xəstəliklərin, ilk növbədə süd vəzi və yumurtalıq xərçənginin inkişaf riskinin artması ilə əlaqəli olan BRCA1 və BRCA2 genlərindəki mutasiyalar üçün xüsusi olaraq çoxlu sayda testlər hazırlanmışdır. BRCA mutasiyası aşkarlanan amerikalı aktrisa Ancelina Coli bu iki gen üçün ayrıca “reklam” etdi. Bu genlərdəki “qırılmaların” prostat və mədəaltı vəzi xərçənginin inkişaf ehtimalının artması ilə əlaqəli olduğu barədə də təkliflər var; bu məlumatlar hazırda elmi araşdırma mərhələsindədir. Lakin belə mutasiyaların olması o demək deyil ki, insan mütləq xərçəngə tutulacaq.
BRCA genlərindəki mutasiyaları müəyyən etmək üçün analizlərlə yanaşı, təxminən 20-30 geni oxuyan daha geniş testlər də mövcuddur ki, bu da bir sıra onkoloji xəstəliklərin inkişafı ilə əlaqələndirilir. Onlardakı mutasiyalar tez-tez BRCA1/2 ilə müqayisədə daha az penetranlığa malikdir (təzahür etmə ehtimalı), lakin onların xəstəliyin inkişaf riskinin müəyyən qədər artması ilə əlaqəli olduğu bilinir. Tez-tez bu testlərə daxil edilən genlərə PTEN, CHEK2, NBN, TP53, PALB2 və bir neçə başqaları daxildir.
Bəs indi, əgər o, hələ istehsal olunmayıbsa, heç olmasa ruslar üçün əlçatandırmı?
— Kistik fibroz və ya fenilketonuriya kimi ən çox yayılmış irsi xəstəliklərin fərdi mutasiyaları üçün testlər mövcuddur. Onkologiyada biz təəssüf ki, geridə qalmışıq, o cümlədən belə testlərin qeydiyyatı ilə bağlı çətinliklərə görə. Mərkəzimizdə siz populyasiyamız üçün BRCA1 və 2 genlərində ən çox rast gəlinən bir neçə mutasiyanı müəyyən edən pirosekvensiya texnologiyalarına (birinci nəsil texnologiyalar) əsaslanan testlərdən keçə bilərsiniz. Ancaq hələlik, əlbəttə ki, bu, bütün genomun hərtərəfli təhlilindən uzaqdır.
Erkən diaqnostik testlərin praktiki onkologiyaya tətbiqinə nə mane olur?
— Hələ ki, bu cür testlər hələ də kifayət qədər dəqiq deyil, lakin bu, yeganə problem deyil. Xəstəliyin heç bir əlaməti yoxdursa, bir insanı mütəmadi olaraq nisbətən bahalı testlərə necə göndərmək (və niyə?) aydın deyil. Əlbəttə ki, hər kəs xərçəngin inkişafını çox erkən mərhələdə aşkar etmək üçün bir testə ehtiyacı olduğuna özü qərar verə bilər, lakin bunun nə qədər tez-tez edilməsi açıq bir sualdır. Buna görə də, hazırda testlər erkən diaqnoz üçün deyil, terapiyanın effektivliyini, həmçinin müalicədən sonra bədənin vəziyyətini izləmək üçün hazırlanır. Yəni, özünü tamamilə sağlam hiss edən insan vaxtaşırı qanda şiş DNT-sinin olub-olmadığını izləmək və residiv başlanğıc anını qaçırmamaq üçün testdən keçə bilər.
Əlavə problem odur ki, Rusiyada NGS texnologiyalarına əsaslanan testlərin hələ qeydiyyat şəhadətnaməsi yoxdur və buna görə də diaqnostika mərkəzləri və laboratoriyaların praktikasına daxil edilə bilməz. Elmi mərkəzlərdə onlar hazırda elmi-tədqiqat işlərinin bir hissəsi kimi həyata keçirilir – ona görə ki, xəstələrin bu tip diaqnostikaya çıxışı çətinləşir və analizlərin ödənişi məsələsi açıq qalır. Xüsusi irsi xəstəliklərə meyllilikdən məsul olan mutasiyaları axtarmaq üçün genetik testlər təklif edən özəl şirkətlər var. Siz həmçinin onlardan tam genom analizi sifariş edə bilərsiniz. Ancaq hələlik bunlar rəsmi diaqnostik testlər deyil və daha çox bir növ əyləncəli genetika kimi təqdim olunur.
Qüsurlu bir genin olması və hələ də xərçəngə tutulmaması mümkündürmü?
– Bəli, əlbəttə. Bu, irsi xəstəliyə meyllilik testindən keçmək istəyən xəstəyə çatdırılmalı olan son dərəcə vacib bir məqamdır. İkinci valideyninizdən ikinci bir “sağlam” alel aldığınız üçün, hər hansı bir onkoloji xəstəlik olmadan uzun və xoşbəxt bir həyat yaşaya bilərsiniz.
İnsan genetik pasportu almaqla xərçəngə tutulma riskinin qarşısını almaq mümkündürmü? Bəs niyə sağlam əhali üzərində genetik skrininq aparılmır?
— Bu gün patogenetik terapiya (bir sıra xəstəliklərin inkişafına cavabdeh olan genlərin korreksiyası) haqqında danışmaq hələ tezdir. Bir gün biz “genetik pasport” məlumatlarına əsaslanaraq terapiyanın təyin ediləcəyi nöqtəyə gələcəyik, lakin bu hələ gələcək üçün bir məsələdir. Hal-hazırda biz yalnız əminliklə deyə bilərik ki, genetik məlumatlara əsaslanaraq, fərdiləşdirilmiş terapiya bir sıra hallarda təyin edilə bilər və bu, həqiqətən də xəstəliyin gedişatını yüngülləşdirə bilər və hətta ağır irsi sindromlu insanlara tam həyat sürməyə imkan verə bilər.
Sağlam insanların müayinəsi olduqca mürəkkəb bir mövzudur. Xərçəngə meylli olduqları barədə məlumatlardan hər kəs faydalanmır: insanlar bundan sonra çox narahat olmağa başlayırlar. Buna görə də, sağlam əhalini xərçəng də daxil olmaqla bütün məlum meyllər üçün skrininq etməyə dəyərmi sualı mübahisəli olaraq qalır. Təsəvvür edin ki, sizə mutasiya diaqnozu qoyulub, bununla bağlı hələ heç nə edə bilməzsiniz, amma indi bu “bilik”lə yaşamaq məcburiyyətindəsiniz.
